中药作为临床有效药物，具有化学成分结构类型丰富且骨架复杂多变的典型特征，是新化合物发现特别是先导化合物发现的重要来源。喹诺里西啶类生物碱是在豆科植物中普遍存在的一类生物碱，具有抗癌、抗炎、抗惊厥、抗纤维化、抗病毒、抗心律失常等生物活性。其结构骨架为2个哌啶环母核骈合而成的双氮生物碱，具有结构变化大、紫外吸收弱、手性中心多等特点，难以通过紫外检测确定不同亚型结构。虽然不同结构亚型的喹诺里西啶类生物碱质谱裂解行为有一定差异，但由于该类双氮生物碱质谱离子化仅呈现单电荷状态，因此难以用常规的氮规则进行该类化合物的有效过滤。此外，大量其他类化合物特别是高含量成分如黄酮、萜类等对其质谱鉴定造成显著干扰，因此建立有效的喹诺里西啶类生物碱富集和鉴定策略对其深度表征具有重要意义。

针对上述问题，研究组以豆科植物苦参Sophora flavescens Ait为例建立了喹诺里西啶类生物碱的综合表征策略。首先基于FC8HL色谱柱开发了喹诺里西啶类生物碱高选择性富集方法。在经过一系列的分离条件优化后，以含0.2%（v/v）甲酸的甲醇和30 mM甲酸铵为洗脱液收集生物碱组分，有效地消除了非生物碱类成分的干扰，显著提高了生物碱成分分析的效率和准确性。然后采用高分辨率多级质谱技术系统地研究了喹诺里西啶类生物碱各种结构骨架的碎裂模式，包括苦参碱型、金雀花碱型、苦豆碱型和臭豆碱型。最后将标准品裂解规律和二级质谱（MS2）、三级质谱（MS3）观察到的碎片与分子网络聚类特征相结合，深入表征富集的生物碱组分。

通过上述策略从苦参中共鉴定出186种喹诺里西啶类生物碱，包括151个苦参碱型、4个金雀花碱型、9个臭豆碱型、6个苦豆碱型、2个羽扇豆碱型和14个二聚体（8个新化合物）。在这些成分中有131个为在天然产物中首次报道的新化合物，此外还发现了一系列未报道的取代基。本研究结果不仅加深了对喹诺里西啶类生物碱结构多样性的理解，也为其他植物中喹诺里西啶生物碱的全面表征提供了一种新的研究范式。该研究相关成果已发表于Talanta。（文/图 张震、余文怡）

图1 苦参中喹诺里西啶类生物碱研究

图2 苦参中喹诺里西啶类生物碱富集图（A）、不同结构亚类喹诺里西啶类生物碱穿透率（B）

图3 苦参中喹诺里西啶类生物碱鉴定流程图（A）、鉴定结果统计图（B）