夏天无是罂粟科植物伏生紫堇Corydalis decumbens（Thunb.）Pers.的干燥块茎，是一种常用的中药材，主要分布于江西、江苏、安徽、浙江、福建、湖南、湖北等地，其中江西省鹰潭市余江区是夏天无药材的传统产区和优质产区，也是中国最大的生产基地，其产量占全国的90%以上，是中国国家地理标志产品。夏天无味苦，微辛，性温，归肝经，具有活血止痛，舒筋活络，祛风除湿等功效，中医常用于治疗中风偏瘫，头痛，跌扑损伤，风湿痹痛，腰腿疼痛等疾病。药理学研究表明，夏天无具有多种活性作用，包括镇痛、抗病毒、抗炎、神经保护、抑制血栓形成和促进血管生成等，这些活性主要是由异喹啉类生物碱—夏天无的主要活性成分发挥的。然而目前关于夏天无生物碱类成分的研究还不够深入，不同产地之间成分差异的研究报道较少，导致差异的具体成分也不明确，阻碍了夏天无道地产区药材的推广和使用。

图 1.（A）正离子模式下夏天无已鉴定成分的提取离子流图；（B）夏天无已鉴定成分统计分析；（C）不同类别中已报道和未报道化合物的分布情况；（D）具有未报道取代基组合的新化合物的推测结构

针对上述问题，本草药靶与靶效物质发现研究组开发了一种结合超高效液相色谱-高分辨质谱（UHPLC-HRMS）和化学计量学的综合分析方法，对来自不同产地的夏天无进行分析。首先，采用超高效液相色谱串联超高分辨四级杆静电场轨道阱质谱仪（UHPLC-Q/Orbitrap HRMS）对夏天无进行深度成分鉴定，结合数据库匹配、裂解规律归属以及标准品对比，共鉴定出151种化合物，其中包括139种异喹啉生物碱，分为原小檗碱类、阿朴啡类、苄基异喹啉类、苯酞异喹啉类和小檗碱类等。在已鉴定成分中，有86种为在夏天无中首次发现的成分，此外还发现了8种含有未报道取代基组合的异喹啉生物碱（图1）。然后基于上述已鉴定成分，采用主成分分析（PCA）和偏最小二乘判别分析（OPLS-DA）对来自6个产地共33批夏天无进行化学计量学分析，OPLS-DA结果表明产自江西的夏天无和产自其它地区的夏天无分为了明显的两类，进一步分析发现66个生物碱是导致产地差异的关键鉴别成分（图2）。

图2. 正交偏最小二乘判别分析（OPLS-DA）得分图（A），200次置换检验（B）和VIP 值分析（C）

该研究大大扩展了夏天无的化学成分基础，为后续药理学研究提供了新的目标，化学计量学分析所表明的产地差异为夏天无道地药材的临床应用奠定了基础。该研究相关成果已发表于Journal of Separation Science。（文/图 朱金凤、余文怡）